自動細胞解析分離装置 (Flow Cytometer)

細胞自動解析分離装置室（新館３階）

担当職員：篠河栄利子
内線：2623
阿久津弘明
内線：2620


自動細胞解析装置ベクトン・ディキンソン　FACSCalibur		自動細胞解析分離装置ベクトン・ディキンソン FACSAria II

お願い

毎週月曜日（祝休日の場合は翌日）の午前中は定期メンテナンスを行っています。メンテナンス中は測定できませんが、至急の場合は担当職員に連絡下さい。

利用法

機器の操作は、原則として利用者が行なうこととしますが、初めての方には担当職員が機器操作の指導をしますので申し出て下さい。
装置の使用は予約制になっています。前週金曜日までに据え付けの予約用紙に必要事項を記入して下さい。
使用希望時間が重なった場合は、利用者間で話し合い決めて下さい。
試料は測定直前に40μmのナイロンメッシュを通し撹拌して下さい。そのまま測定するとフローセルを詰まらせます。
試料測定に際し装置およびその周辺んを汚した場合は速やかに清掃をして下さい。
装置を使用するに当り、データおよび測定プロトコルを保存する3.5インチ（FACSCalibur）または5インチ（EPICS ELITE）光磁気ディスクが必要になります。使用講座または使用者で用意して下さい。規格等に関しては担当技官に連絡して下さい。
FACSCaliburで測定の場合は、測定データを必ずハードディスクへ保存して下さい。MOへの直接保存はトラブルの原因になります。尚、測定終了後は測定データを速やかにハードディスクから使用者のMOディスクへ移動して下さい。許可無くハードディスク上に残しているデータはセンターで消去致します。
FACSCaliburで測定の場合、サンプルチューブは専用品以外使用できません。”フローサイトメトリー用試験管類”より指定品を購入のうえご使用下さい。

簡易手引書（PDF版：ベクトン・ディキンソン　FACSCalibur用）（学内限定）　”簡易取扱説明書”、”フローサイトメトリー入門”、”分析入門”、”システム概要”、”CELLQuest説明書”、”CELLQuestメニュー一覧”、”サンプルチューブ”
その他FACSCaliburに関しての技術情報はこちら（日本ベクトン･ディッキンソン株式会社　技術サポートのページ）を参照下さい。
簡易手引書（PDF版：COULTER EPICS ELITE ESP用）（学内限定）　”スタートアップからCV測定”、”サンプル測定”、”シャットダウン”

用途の概要

　なんらかの方法でsingle cell suspensionにした試料を蛍光染色しレーザーを照射します。得られた散乱光および蛍光から細胞の情報を得ます。例えば蛍光による分析では、蛍光抗体法による細胞表面抗原の解析、DNA染色によるセルサイクルの解析。散乱光のみの場合では、細胞のサイズ分布分析など。

FACSCalibur用データ解析フリーソフトウエア

　Windows上でWinMDIというソフトウエアーを用いるとデータ解析を行うことが出来ます（細胞周期解析は不可）。次のURLより取得して下さい。 WinMDI　（http://facs.scripps.edu/software.html）
尚、このソフトウエアーはBD社とは基本的には関係が有りませんので、ご質問等は行わないで下さい。

仕様

自動細胞解析分離装置(Becton, Dickinson　FACSCalibur)

サイトメーター

レーザー

アルゴン	: 488nm
フローセル	: 内径430×100μm

測定パラメーター

　前方散乱光、側方散乱光、緑色蛍光、オレンジ蛍光、赤色蛍光

ワークステーション

コンピュタ	: Macintosh
光磁気ディスク	: 3.5インチ 640MB
解析ソフトウェア	: CELLQuest™(測定、解析用)
	: ModFitLT™(細胞周期解析用)
	: FACSComp™(測定条件設定、感度試験用)
	: PAINT-A-GATEPRO™（マルチカラーデータ解析）
	: Attractors™（マルチカラーデータ解析）

自動細胞解析分離装置(Becton, Dickinson FACSAria Ⅱ)

サイトメーター

レーザー

固定レーザー	: 488nm
HeNeレーザー	: 633nm
固定レーザー	: 375nm
フローセル	: 100μm

性能

　蛍光検出感度
　　ＦＩＴＣ：125ＭＥＳＦ、ＰＥ：125ＭＥＳＦ

　蛍光検出分解能
　　ＰＩ-ＡｒｅａパラメータのＣＶ値（変動係数）が3％以下
　　Ｈｏｅｃｈｓｔ-ＡｒｅａパラメータのＣＶ値（変動係数）が3.5％以下

　前方・側方散乱光検出感度
　　ノイズから血小板を分離可能、粒形0.5μｍのビーズが検出可能

　前方・側方散乱光検出分解能
　　リンパ球・単球・顆粒球の３分画が検出可能（ヒト末梢血中の赤血球を溶解後測定した場合）

　サンプル解析速度
　　70,000イベント/秒（8パラメータ、12対の蛍光補正ペアの場合）

　サンプル分取速度
　　30,000イベント/秒

ソーティング機能

　2方向（12×75ｍｍチューブまたは15ｍｌチューブを使用）
　4方向（12×75ｍｍチューブまたはマイクロチューブを使用）
　スライドグラスおよびマルチウェルプレート（6,24,48,96,384）へのソーティング

ソーティングサンプル温度管理

　冷却または保温が可能（4・20・37・42℃）

オペレーヨンシステム

　Windows　ＸＰ

解析ソフトウェア

　ＢＤ　ＦＡＣＳ　Ｄｉｖａソフトウェア

信号処理

　信号解像度
　　262,144チャンネル

　データ取り込みチャネル数
　　最大15パラメータ（散乱光2パラメータおよび蛍光13パラメータ）

　蛍光補正機能
　　各レーザー内、レーザー間すべての蛍光検出器間で可能

ＢＤ　ＦＡＣＳ　ＡｒｉａⅡで測定可能な蛍光色素

Ｆｌｕｏｒｏｃｈｒｏｍｅｓ	Ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ　Ｌａｓｅｒ（nm）	Ｅｍｉｓｓｉｏｎ　Ｒａｎｇｅ（nm）
FITC,Alexa488 　PE 　PE-TR 　PerCP,PerCP-Cy5.5 　PE-Cy7	blue488	(500～800）
APC,Alexa647 　APC-H7,APC-Cy7	red633	(650～800)
Hoechst-Red 　Hoechst-Blue	NearUV375	(400～550)

設備・機器利用便覧

実験実習機器技術支援部門のホームページ